有機氯殺蟲劑六六六和甲基對硫磷的共降解生物降解技術研究

六六六(HCH)是一種廣譜性有機氯殺蟲劑,我國20世紀六、七十年代曾大量施用。由於六六六是一種“持久性有機汙染物”(POPs,是Persist Organic Pollutants的簡寫),中文翻譯是鑒於持久性有機汙染物(POPs)已對人類健康和環境構成日趨嚴重的威脅。2001年5月22-23日,聯合國環境署在斯德哥爾摩組織召開了《關於持久性有機汙染物的斯德哥爾摩公約》的外交全權代表會議,並通過了《斯德哥爾摩公約》。中國政府於2001年5月22-23日簽署。《斯德哥爾摩公約》旨在減少或消除持久性有機物的排放,保護人類健康和生態環境免受其危害。

將克隆得到的脫鹵素酶基因和綠色熒光蛋基因在有機磷殺蟲劑降解菌中實現了功能性表達,構建了一株能快速降解六六六及同時礦化有機磷農藥殘留的基因工程菌,通過檢測綠色熒光蛋可以實現對該工程菌的在線監測。本研究首先構建了含有脫鹵素酶基因(linA 和 linB )和綠色熒光蛋白基因(egfp)的廣宿主表達載體,3個基因分別由不同的組成型啟動子調控其表達,將該重組載體轉化至本實驗室已分離到的野生型有機磷農藥降解菌Stenotrophomonas sp.YC-1中,篩選培養轉基因工程菌,通過測定重組菌中LinA、LinB酶活性和GFP熒光活性證實了上述3個基因在重組菌中的功能性表達。同時,研究證明YC-1在轉入重組質粒前後它的生長特性及降解能力均沒有發生變化。通過氣相色譜測定了該重組菌在無機鹽培養基中和實驗室規模的土壤中對10ppmγ-六六六和100ppm甲基對硫磷的共降解作用,結果表明:該菌對γ-六六六和甲基對硫磷均具有快速的降解能力。本研究為該基因工程菌應用於消除土壤和農作物中六六六及有機磷農藥殘留奠定了基礎。同時,由於脫鹵素酶LinB的底物廣譜性,該工程菌還具有降解環境中多種鹵代化合物及其它汙染物的潛力。

該工作的第一作者為抗性分子遺傳學研究組張衡博士研究生,喬傳令研究員為文章的通訊作者。本研究工作得到了國家高技術研究發展計劃(863計劃)“廢棄農藥類持久性有機汙染物處理技術” (2007AA06Z335)及中國科學院知識創新工程(KSCXZ-YW-G-008)基金的資助。

論文鏈接:
Heng Zhang (張衡), Chao Yang (楊超) and Chuanling Qiao (喬傳令). (2009) Development of an Autofluorescent Organophosphates-Degrading Stenotrophomonas sp. with Dehalogenase Activity for the Biodegradation of Hexachlorocyclohexane (HCH). Bioresource Technology 100: 3199-3204

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